Efeito do estrogênio na Biogênese Mitocondrial Mariana Nigro e Isabel Caetano

Estrogênio Hormônio sexual (diversos efeitos) anorexigênico hipotálamo  diminui a ingestão de comida Regulação do gasto energético ? ? ? ? ? ? ? ? MENOPAUSA Ganho de peso e aumento da adiposidade Resistência à insulina Diabetes tipo 2 Doenças cardiovasculares Aumento da expectativa de vida: mulheres passam aproximadamente 1/3 da vida na menopausa Modelo animal: ovariectomia

Eficiência Alimentar Rogers et al., 2009

Gasto Energético Rogers et al., 2009

Ovariectomia-Inflamação no tecido adiposo Rogers et al., 2009

Obesidade- Inflamação no tecido adiposo Tilg e Moschen, 2006.

eNOS reduzida em modelos de obesidade Tecido adiposo Branco Valerio et al, 2006. Perfil semelhante em BAT e músculo esquelético

↓eNOS→ ↓ biogênese mitocondrial Valerio et al, 2006.

TNF-α→↓eNOS→ ↓ biogênese mitocondrial Valerio et al, 2006.

Resumo Ovariectomizado→↑eficiência alimentar →↑tecido adiposo branco →↑ TNF-α tecido adiposo branco Modelos de obesidade →↑ TNF-α tecido adiposo branco e músculo → TNF-α ↓ expressão de eNOS no tecido adiposo branco, BAT e músculo→ ↓ fatores de transcrição para a biogênese mitocondrial → ↓ mitocôndrias

OBJETIVO GERAL Modelo animal Investigar mecanismos pelos quais o estrogênio aumenta o gasto energético Modelo animal 3 grupos: sham; ovariectomizado+ veículo; ovariectomizado tratado com 17-estradiol Tratamento (subcutânea-0,7µg/100g p.c.): 15 ou 21 dias Tecidos estudados: músculo esquelético, tecido adiposo marrom, tecido adiposo branco.

METODOLOGIA Análise dos níveis de RNAm no tecido adiposo branco, marrom e músculo esquelético das seguintes moléculas por RT-PCR TNF- e HMGB1 (citocinas pró-inflamatórias); eNOS – NO eleva a biossíntese mitocondrial (Nisoli et. al, 2003) PGC1- , NRF-1 PGC1- + PPAR-γ adipogênese e mitocôndrias + NRF-1 genes codificantes para ptns mitocondriais COX IV e citocromo c

Metodologia Western blot de TNF-, HMGB1, eNOS, PGC1- , NRF-1, COX IV e citocromo c para corroborar os resultados do RNA mensageiro nos extratos de tecido adiposo branco e marrom e músculo esquelético Microscopia eletrônica do tecido adiposo e músculo esquelético para avaliação do número e tamanho das mitocôndrias Parâmetros respiratórios em mitocôndrias isoladas