UPCII M Microbiologia Teórica 15

Apresentação em tema: "UPCII M Microbiologia Teórica 15"— Transcrição da apresentação:

1 UPCII M Microbiologia Teórica 15
2º Ano 2010/2011

2 Sumário Capítulo XIV. Diagnóstico Microbiológico
Produtos biológicos para análise Colheita e transporte de amostras Identificação do agente infeccioso: Diagnóstico Directo Cultura e isolamento Caracterização do microrganismo Antibiograma Detecção da resposta imune T15 MJC

3 Diagnóstico Microbiológico
Paciente Pedido de Exame Colheita Transporte Laboratório Resultado Interpretação Diagnóstico e Terapia Epidemiologia Biologia e Patogenia T15 MJC

4 Sensibilidade e Especificidade
+ - Presença do Microrganismo Verdadeiro (V+) Falso (F-) Ausência do Microrganismo (F+) (V-) T15 MJC

5 Colheitas a partir de: Excreções Secreções Tecidos Órgãos 8-11-2011
T15 MJC

6 Colheita e Transporte das amostras
Anaeróbios / Fastidiosos / Vírus Psicrófilos / Mesófilos Colheitas de locais com MI Contaminação do ambiente (Espectoração e saliva) Meio de recolha  Eficácia Meio de transporte Antibioterapia precedente Tempo da colheita /Rota de infecção e ciclo de infecção Tempo de espera para processamento T15 MJC

7 Análise laboratorial Directamente (1) Após cultura (2)
Presença de antigénios (A) Presença de sequências genómicas (B) Após cultura (2) Pesquisa e identificação da toxina T15 MJC

8 Cryptococcus neoformans
1 – Observação directa Ovos de helmintas Espiroquetas Cryptococcus neoformans Preparação Tzanck (infecção por vírus herpes simplex ou varicella-zoster) T15 MJC

9 1 - Observação directa - Colorações
A= Não acid fast B=Acid Fast Fluido CerebroEspinal Bacillus antracis T15 MJC

10 1 - Observação directa – Microscopia electrónica
T15 MJC

11 1 - Observação directa – Imunocitoquímica
T15 MJC

12 1 - Observação directa – Sondas moleculares
T15 MJC

13 Condições 2 - Cultura Meios de Cultura: Função?
Meios de transporte: Função? Incubação: (Temperatura e oxigénio) T15 MJC

14 Desconhecido Tecidos estéreis Microflora Normal 2 - Cultura
Reacções com o meio de cultura Desconhecido Tecidos estéreis Streptococcus beta hemolítico Microflora Normal T15 MJC

15 Identificação vs Distinção
2 - Cultura Após cultura segue-se identificação: Tipagem: Serotipagem Biotipagem Tipagem de fagos Tipagem de bacteriocinas Multiloccus enzyme electrophoresis (MLEE) Pulse Field Gel Electrophoresis (PFGE) Restriction Fragment Lenght Polymorphism (RFLP) Ribotyping Identificação vs Distinção T15 MJC

16 2 – Cultura – Permite antibiograma
T15 MJC

17 A – Detecção de antigénios
T15 MJC

18 A – Detecção de antigénios
Que proteínas? Detecção de Proteínas T15 MJC

19 B- Detecção de sequências genómicas
Detecção de ácidos nucleicos PCR T15 MJC

20 B- Detecção de sequências genómicas
PCR T15 MJC

21 B- Detecção de sequências genómicas
PCR Visualização O que indica? Utilização noutras técnicas T15 MJC

22 B- Detecção de sequências genómicas
Detecção de ácidos nucleicos RT-PCR (Real Time) RT-PCR (Reverse Transcription) Multiplex PCR Nested PCR T15 MJC

23 B- Detecção de sequências genómicas
Detecção de ácidos nucleicos Sondas moleculares FISH T15 MJC

24 3 – Resposta imunitária Tradicionais
Medem a resposta humoral pela actividade dos anticorpos Aglutinação T15 MJC

25 3 – Resposta imunitária Tradicionais – Reacção de aglutinação
T15 MJC

26 3 – Resposta imunitária Activação do complemento T15 MJC

27 3 – Resposta imunitária Mais Recentes – Imunoensaios enzimáticos
Medem a resposta humoral pela presença dos anticorpos T15 MJC

28 3 – Resposta imunitária T15 MJC

29 3 – Resposta imunitária T15 MJC

30 Bibliografia Capítulo 6 Capítulo 17 T15 MJC