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UPCII M Microbiologia Teórica 15 2º Ano 2010/2011.

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1 UPCII M Microbiologia Teórica 15 2º Ano 2010/2011

2 Sumário T15 MJC2 Capítulo XIV. Diagnóstico Microbiológico Produtos biológicos para análise Colheita e transporte de amostras Identificação do agente infeccioso: Diagnóstico Directo Cultura e isolamento Caracterização do microrganismo Antibiograma Detecção da resposta imune 8-11-2011

3 Diagnóstico Microbiológico Paciente Pedido de Exame Colheita Transporte Laboratório Resultado Interpretação Diagnóstico e Terapia 8-11-2011 3T15 MJC

4 Sensibilidade e Especificidade +- Presença do Microrganismo Verdadeiro (V+) Falso (F-) Ausência do Microrganismo Falso (F+) Verdadeiro (V-) 8-11-2011 T15 MJC

5 Colheitas a partir de: Excreções Secreções Tecidos Órgãos 8-11-2011 T15 MJC5

6 Colheita e Transporte das amostras 8-11-2011 T15 MJC Anaeróbios / Fastidiosos / Vírus Psicrófilos / Mesófilos Colheitas de locais com MI Contaminação do ambiente (Espectoração e saliva) Meio de recolha Eficácia Meio de transporte Antibioterapia precedente Tempo da colheita /Rota de infecção e ciclo de infecção Tempo de espera para processamento

7 Análise laboratorial Directamente (1) Presença de antigénios (A) Presença de sequências genómicas (B) Após cultura (2) Presença de antigénios (A) Presença de sequências genómicas (B) Pesquisa e identificação da toxina 8-11-2011 T15 MJC7

8 1 – Observação directa Ovos de helmintas Cryptococcus neoformans Espiroquetas Preparação Tzanck (infecção por vírus herpes simplex ou varicella-zoster) 8-11-2011 T15 MJC

9 1 - Observação directa - Colorações Fluido CerebroEspinal Bacillus antracis A= Não acid fast B=Acid Fast 8-11-2011 9T15 MJC

10 1 - Observação directa – Microscopia electrónica 8-11-2011 10T15 MJC

11 1 - Observação directa – Imunocitoquímica 8-11-2011 11T15 MJC

12 1 - Observação directa – Sondas moleculares 8-11-2011 12T15 MJC

13 2 - Cultura 8-11-2011 13T15 MJC Meios de Cultura: Função? Meios de transporte: Função? Incubação: (Temperatura e oxigénio)

14 2 - Cultura Streptococcus beta hemolítico 8-11-2011 14T15 MJC Reacções com o meio de cultura

15 2 - Cultura Após cultura segue-se identificação: T15 MJC Multiloccus enzyme electrophoresis (MLEE) Pulse Field Gel Electrophoresis (PFGE) Restriction Fragment Lenght Polymorphism (RFLP) Ribotyping Serotipagem Biotipagem Tipagem de fagos Tipagem de bacteriocinas 8-11-2011 15

16 2 – Cultura – Permite antibiograma T15 MJC 8-11-2011 16

17 A – Detecção de antigénios 8-11-2011 T15 MJC

18 A – Detecção de antigénios Detecção de Proteínas 8-11-2011 T15 MJC

19 B- Detecção de sequências genómicas Detecção de ácidos nucleicos PCR 8-11-2011 19T15 MJC

20 B- Detecção de sequências genómicas PCR T15 MJC 8-11-2011 20

21 B- Detecção de sequências genómicas PCR Visualização Utilização noutras técnicas T15 MJC 8-11-2011 21

22 B- Detecção de sequências genómicas Detecção de ácidos nucleicos RT-PCR (Real Time) RT-PCR (Reverse Transcription) Multiplex PCR Nested PCR T15 MJC 8-11-2011 22

23 B- Detecção de sequências genómicas Detecção de ácidos nucleicos Sondas moleculares FISH T15 MJC 8-11-2011 23

24 3 – Resposta imunitária Tradicionais Medem a resposta humoral pela actividade dos anticorpos Aglutinação 8-11-2011 T15 MJC

25 3 – Resposta imunitária Tradicionais – Reacção de aglutinação 8-11-2011 T15 MJC

26 3 – Resposta imunitária Activação do complemento 8-11-2011 T15 MJC

27 3 – Resposta imunitária Mais Recentes – Imunoensaios enzimáticos Medem a resposta humoral pela presença dos anticorpos 8-11-2011 T15 MJC

28 3 – Resposta imunitária 8-11-2011 T15 MJC

29 3 – Resposta imunitária 8-11-2011 29T15 MJC

30 Bibliografia T15 MJC30 8-11-2011 Capítulo 6 Capítulo 17


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