Termogênese nos Seres Vivos Papel da SERCA na termogênese maligna observada em animais tratados com Ecstasy Thiago Sá e Amanda R. R. Vicentino.

Apresentação em tema: "Termogênese nos Seres Vivos Papel da SERCA na termogênese maligna observada em animais tratados com Ecstasy Thiago Sá e Amanda R. R. Vicentino."— Transcrição da apresentação:

1 Termogênese nos Seres Vivos Papel da SERCA na termogênese maligna observada em animais tratados com Ecstasy Thiago Sá e Amanda R. R. Vicentino

2 Introdução Ecstasy - metilenodioximetanfetamina (MDMA) Sintetizado pelo químico alemão Anton Kölisch em Darmstadt Patenteado pela Merck em 1914 Função em militares (contra sono e frio) Efeitos tóxicos iniciais pelos militares Norte-americanos Abandonada – causava empatia por estranhos Redescoberto em 1970 em festas e raves Proibido inicialmente em 1977 no Reino Unido e 1985 nos EUA 2ª maior droga ilicita utilizada no mundo (cerca de 8,3 milhoes já experimentaram)

3 Introdução Ação no SN  Principais efeitos na via da serotonina, tendo também transmissão via dopamina e norepinefrina  Liga-se a todos os 3 transportadores de monomaminas, com mais alta afinidade a 5-HT  Liga-se a receptores clássicos, com alta afinidade a 5-HT2, α2-adrenérgico, M1 muscarinico  Baixa afinidade a M2, α1 e β-adrenergicos e 5-ht1  Aumenta 5-HT extracelular:  Aumento da liberação pelas vesiculas sinápticas  Bloqueio da recaptação  Inibição da MAO Pode causar depleção de 5-HT por até 12 meses em ratos  Rápida liberação de Dopamina

4 Introdução Efeitos não neuronais  Respostas negativas cerebrovasculares  Efeito inibidor do sistema imune Efeitos psicológicos  Sensação de euforia  Mudanças na percepção (luz e som)  Redução na posição defensiva  Abertura emocional  Empatia  Redução na inibição  Aumento na agressividade  Depressão

5

6

7 Introdução Hipertermia maligna  Principal causa morte em indivíduos usuários de ecstasy  Ocorre em decorrência do excessos de monoaminas no SNC  É causada em virtude da síndrome serotoninérgica causada principalmente quando há associação com outras drogas

8

9 SERCA  Proteína de 110Kda  Bombeia cálcio do Cito(sarco)plasma para dentro do retículo Cito(sarco)- plasmático com a ajuda da hidrólise do ATP  Em baixas concentrações (100nM)  Hidrólise de ATP desacoplada ao transporte de cálcio produz calor Introdução  Produção de calor especialmente em fibras de músculo branco  Estudos mostram que essa bomba pode responder a estímulos adrenérgicos e de hormônios tireóideos

10 Avaliar mudanças na expressão de SERCA-1 e SERCA-2 em músculos brancos e vermelhos de ratos em tratamentos agudos e crônico Avaliar alterações nas atividades ATPase, captação de cálcio e produção de calor nas fibras brancas e vermelhas Avaliar possível efeito sinérgico da dose aguda de MDMA com exposição aguda ao frio Objetivos

11 Tratamento 1 Hipertermia aguda Grupo 1 = Controle Grupo 2 = MDMA Grupo 1 = Controle Grupo 2 = MDMA Grupo 1 = Controle Grupo 2 = MDMA Grupo 1 = Controle Grupo 2 = MDMA 28°C 4°C Tratamento 2 Hipertermia crônica Grupo 3 = Controle Grupo 4 = MDMA Grupo 3 = Controle Grupo 4 = MDMA Grupo 3 = Controle Grupo 4 = MDMA Grupo 3 = Controle Grupo 4 = MDMA 28°C 4°C 1 dia 14 dias Tratamento Análise comparativa de SERCA e produção de calor

12 Metodologia Análise dos níveis de SERCA-1 e SERCA-2: Western Blot das vesículas retiradas de músculos vermelhos e brancos Análise realizada 3h após injeção de MDMA (tratamento agudo) ou após os 14 dias (tratamento crônico) Tratamento dos animais: Ratos Winstar (250-300g) mantidos em 24°C e 4°C com acesso livre a água e comida Ciclos de 12:12 (luz a partir de 7:00) Tratamento com injeção aguda de MDMA na dose de 7,5 mg/Kg ou salina (1,0 mL/Kg) (injeções dadas as 13:00) ou injeção crônica de MDMA na dose de 7,5 mg/Kg durante 14 dias uma vez ao dia; Controle da temperatura corporal: Temperatura medida por via retal A temperatura corporal será medida 30 min e 1h após injeção para ambos tratamentos

13 Metodologia Análise da Captação de Cálcio: Será medida a partir de filtração segundo de Meis, L., 2001; Análise realizada 3h após injeção de MDMA (tratamento agudo) ou após os 14 dias (tratamento crônico). Análise da Atividade ATPase : A atividade da ATPase será medida através da liberação de 32 Pi oriundo do [γ - 32 P]ATP (de Meis, 2003); Análise realizada 3h após injeção de MDMA (tratamento agudo) ou após os 14 dias (tratamento crônico). Análise da Produção de Calor: A produção de calor será medida por calorimetria segundo de Meis, L., 2003; Análise realizada 3h após injeção de MDMA (tratamento agudo) ou após os 14 dias (tratamento crônico).

14 Tratamento 3 Hipertermia aguda Grupo 1 = Controle Grupo 2 = MDMA Grupo 3 = MDMA + Thapsigargina Grupo 1 = Controle Grupo 2 = MDMA Grupo 3 = MDMA + Thapsigargina 1 dia Tratamento Todos os parâmetros avaliados anteriormente serão repetidos neste experimento Uma vez a SERCA estando aumentada nos músculos esqueléticos durante a hipertermia aguda e crônica em animais tratados com MDMA... Objetivo: Verificar se o uso de inibidor da SERCA (thapsigargina) reverte a hipertermia aguda causada por MDMA.