CARVALHO, Daniel Cardoso; KALAPOTHAKIS,Evanguedes; GODINHO, Hugo (c); GODINHO, Alexandre (c) Departamento de Farmacologia e Departamento de Zoologia ICB-UFMG.

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Transcrição da apresentação:

CARVALHO, Daniel Cardoso; KALAPOTHAKIS,Evanguedes; GODINHO, Hugo (c); GODINHO, Alexandre (c) Departamento de Farmacologia e Departamento de Zoologia ICB-UFMG

Crescimento populacional Maior demanda de energia elétrica Construção de represas Interrupção de vias migratórias

 Biblioteca Genômica  Isolamento dos clones  Hibridização  Sequenciamento

Sítio de corte da enzima utilizada deixando extremidades coesivas Mapa do vetor utilizado

Escolha da enzima apropriada para a montagem da biblioteca Corte do DNA total com Sau3A Divisão das frações da biblioteca

Técnica de transformação bacteriana utilizada (eletroporação)

Isolamento dos clones da biblioteca seguido de PCR ou mini-prep para a posterior aplicação na membrana

Oligonucleotídeos utilizados como sonda: CA, TC, CTT, ACGA, TA, GGA, AAAG,TATC Hibridização com sondas radioativas

Equipamento de Sequenciamento automático utilizado: ABI 310

Seqüência de um dos microsatélites encontradosSeqüência de outro dos microsatélites encontrados

 PCR dos loci de microsatélite de cada indivíduo.  Gel de poliacrilamida dos produtos de PCR.

 Montagem de tabela com nº e freqüência de MS.  Cálculo da heterozigosidade observada e esperada.

 Definição da distância genética e fluxo gênico entre as populações.  Verificação da necessidade de construçãode mecanismos de transposição. Árvore Genealógica