Laboratório de Biotecnologia LBE Vanessa Valgas dos Santos AVALIAÇÃO DO COMPOSTO AMINOACÍDICO OF SOBRE A INSUFICIÊNCIA RENAL AGUDA E CRÔNICA Laboratório de Biotecnologia LBE Vanessa Valgas dos Santos Profa. da Universidade Federal de Santa Catarina

Principal função do rim consiste na excreção de produtos de degradação Introdução: FUNÇÃO RENAL Principal função do rim consiste na excreção de produtos de degradação Além de atuar:  Regulação do balanço de água e íons inorgânicos: (Na+, Cl-, H+, HCO3-, Ca++, K+, Mg++, HPO4--, etc...) Assegurando a homeostasia  Secreção hormonal: Calcitriol [1,25 (OH)2-Vit. D3], Renina; Eritropoietina

Indivíduo com 70Kg apresenta 3L de plasma Introdução: Excreção de drogas: Fármacos, contrastes, produto metabólico de drogas psicotrópicas etc. Os rins recebem cerca de ¼ do débito cardíaco e filtra cerca de 180 litros de plasma por dia Indivíduo com 70Kg apresenta 3L de plasma Filtrado 60x dia 1.5 L excretados na urina 99% é reabsorvido Bekheirnia M.R., Schrier R.W. 2006

Insuficiência Renal Aguda (IRA): Perda rápida da função renal, resultando em retenção de produtos de degradação nitrogenados (uréia e creatinina) e não-nitrogenados, podendo ocasionar Acidose metabólica, hipercalemia, alterações no balanço hídrico (Bellomo R et al, 2004)

Obstrução na passagem de urina. Fisiopatologia: Resposta adaptativa a uma severa depleção de volume e hipotensão, mantendo a estrutura e a funcionalidade dos néfrons intacta; Em resposta a insultos citotóxicos no rim ocasionando dano estrutural e funcional; Obstrução na passagem de urina. Agraharkar M et al, 2001

Incidência de Insuficiência Renal Aguda (IRA): Nos E.U.A. em 2004: - 1% dos pacientes admitidos nos hospitais apresentaram IRA 2-5% adquiriram IRA durante a hospitalização 70/ 1.000.000 na população Mortalidade: Dependente das formas de IRA 40-50% ocorrem nas alterações funcionais 70-80% nos casos de alteração funcional e estrutural.

LBE: Produção de aminoácidos capazes de modular determinadas funções biológicas FACE MIX NIDI OF OL

Objetivos Específicos: Objetivo Principal: Avaliar o efeito dos compostos aminoacídicos OF e OL sobre a insuficiência renal aguda induzida por gentamicina em ratos Objetivos Específicos: Análises bioquímicas de uréia e creatinina Avaliação histológica da estrutura renal Avaliação imuno-histoquímica de Ki-67 e caspase-3

Gentamicina (100 mg/Kg, i.p, 7 dias) Materiais e Métodos: Ratos Wistar Gentamicina (100 mg/Kg, i.p, 7 dias) Grupos tratados simultaneamente a administração do antibiótico com compostos aminoacídicos (OF e OL) 200µL/Kg, intra-gástrica. Karahan I et al, 2005

Materiais e Métodos: Os animais foram mantidos em um biotério climatizado com temperatura de 211 ºC, com água e comida ad libitum e sob ciclo claro/escuro de 12 horas (início da fase clara as 7:00 a.m.). Experimentos realizados estão de acordo com o guia do Comitê Ético Nacional, que segue os “Princípios e cuidados com animais de laboratório” da publicação do NIH n° 85-23

Resultados : Análise do Efeito dos Compostos Aminoacídicos sobre os Parâmetros Bioquímicos. Controle Gentamicina OF OL Creatinina 0.66±0.085 3.9±0.19 *** 1.2±0.04 ns 1.8±0.19 ** Uréia 46.6±0.66 263±5.4 88.33±3.18 * 150.3±2.02 O resultados representam a média  e.p.m. de 4 animais por grupo. * p0,05 e ** p0,001 quando comparados com o respectivo grupo controle

Avaliação Histológica dos Compostos Aminoacídicos Controle OL OF Gentamicina

Avaliação Toxicológica do Composto OF

Tratamento (ml/kg, via oral) Ensaio Agudo de Toxicidade Tratamento (ml/kg, via oral) Número de mortes Alteração locomotora Ptose palpebral Respiração ofegante   OF 0,4 0/8 OF 2,0 OF 4,0 1/8 OF 18,8 0/10 1/10 2/10 OF 25,0 DL 50 não foi realizada em decorrência da ausência de mortes

Conclusão: O produto aminoacídico OF reduz significativamente as concentrações plasmáticas de creatinina nos animais induzidos a IRA; Através da analise histológica pode-se demonstrar o papel nefroprotetor do composto OF; A realização do ensaio de toxicidade aguda não apresentou resultados significativos; Mais estudos são necessários para a elucidação dos resultados encontrados, mas torna-se clara a aplicabilidade terapêutica do produto.

Referências Bibiográficas Bellomo R, Ronco C, Kellum JA, Mehta RL, Palevsky P; Acute Dialysis Quality Initiative workgroup. Acute renal failure - definition, outcome measures, animal models, fluid therapy and information technology needs: the Second International Consensus Conference of the Acute Dialysis Quality Initiative (ADQI) Group. Crit Care. 2004 Aug;8(4):R204-12. Epub 2004 May 24. Agraharkar M, Safirstein RL: Pathophysiology of acute renal failure. In: Greenberg A, Coffman T, eds. Primer on Kidney Diseases. 3rd ed. San Diego, Calif: Academic Press; 2001: 243-86. Bekheirnia MR, Schrier RW. Pathophysiology of water and sodium retention: edematous states with normal kidney function.Curr Opin Pharmacol. 2006 Karahan I, Atessahin a, Yilmaz S, Ceribasi AO, Sakin F.Prootective effect of lycopene on gentamicin-induced oxidative stress and nephrotoxicity in rats. Toxicology Nov 15;215(3):198-204, 2005