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PublicouJoão Henrique Osório Silveira Alterado mais de 8 anos atrás
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FUNÇÕES DE MICRORGANISMOS NÃO CULTIVÁVEIS
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“O mundo microbiano contém uma grande diversidade de organismos, estruturas e funções. Este trabalho surge pela dificuldade de muitos microrganismos não serem cultiváveis e por isso mesmo impossíveis de estudar pelas metodologias tradicionais da microbiologia. Os avanços recentes no estudo dos genomas e o desenvolvimento de tecnologias que permitem aceder directamente ao DNA sem necessidade de cultivar os organismos, têm vindo a fornecer novas luzes sobre esta diversidade escondida” Prof. António Correia, Univ. de Aveiro
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O que são microrganismos não cultiváveis?
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Conteúdo celular do rRNA usado como medição de taxa de crescimento
Nem sempre se verifica para microrganismos com crescimento lento Por exemplo, os quimiolitoautotróficos aeróbios, oxidantes de nitrato e amónia retêm elevados níveis de rRNA celular em períodos de latência ou de inibição de crescimento
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Novas técnicas desenvolvidas para o estudo de microrganismos não cultiváveis
FISH (Fluorescence in Situ Hybridization) Técnica do Microarray Microautoradiografia PCR amplificação (Polymerase Chain Reaction) Quantitative Dot Blot Isótopos estáveis
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FISH É uma técnica pela qual um segmento de DNA conjugado previamente com um fluorocromo (sonda) hibridiza numa metafase ou interfase com determinado cromossoma
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Microarray Permite verificar os níveis de expressão de diferentes proteínas, independentemente do seu ponto isoeléctrico
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Microautoradiografia
A microautoradiografia tem sido usada para visualizar e contar células dentro das comunidades microbianas que podem integrar os substratos marcados radioactivamente
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FISH-Microautoradiografia
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PCR A reacção em cadeia da polimerase é um método de amplificação de DNA sem o uso de um organismo vivo
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Quantitative Dot Blot É a análise da expressão proteica em células e em tecidos
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Isótopos estáveis A sua utilização na pesquisa de DNA permite estabelecer ligações entre as identidades microbianas e as suas respectivas funções. A sua investigação consiste na colheita de substratos 13C DNA através da centrifugação (gradiente de densidade). Não emitem radiações
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Nitrospira Bactéria não cultivável
Proveniente de aguas residuais de ETARs Mais de 80% da população de Nitrospira está activa num ambiente de lamas activadas. Cresce exponencialmente com piruvato mas não acetato, na presença de oxigénio. Inactiva sob condições desnitrificantes e de fermentação
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Nitrospira
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A importância de microrganismos não cultiváveis para o ambiente
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Diversidade microbiana como indicador da qualidade do solo
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…
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FIM Ana Rita Domingues Filipa Manzoni João Canas Ramalheiro
Vasco Rosa Santos
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