Prof. Dr. Luiz Fernando Bleggi Torres

Apresentação em tema: "Prof. Dr. Luiz Fernando Bleggi Torres"— Transcrição da apresentação:

1 Prof. Dr. Luiz Fernando Bleggi Torres
GLIOBLASTOMA Prof. Dr. Luiz Fernando Bleggi Torres Departamento de Patologia Médica Universidade Federal do Paraná

2 EVOLUÇÃO – 1906 www.jhu.edu/~jhumag/0400web/34.html

3 EVOLUÇÃO – 2006

4 Hibridização “in situ”
Clínica História Raio-X Conhecimento Médico Cirurgia Biópsia 1950 1950 TAC Estereotaxia Imunohistoquímica Citologia do SNC 1980 1980 RNM TAC Espectroscopia Fatores Preditivos Citogenética Biologia Molecular Hibridização “in situ” 1990 1990 Microarrays – Robótica – Terapia Alvo - Células Troncos 2006

5 (adaptado de Bleggi-Torres et al., 1990)

6 Banco de Patologia Tumoral de Curitiba (1990-2001)

7 Banco de Patologia Tumoral de Curitiba (1990-2001) Prevalência dos principais tipos histológicos

8 Banco de Patologia Tumoral de Curitiba (1990-2001) Prevalência das neoplasias por linhagem celular

9 Células neurogliais Astrocitoma Oligodendroglioma Ependimoma Assim,
vaso neurônio oligodendrócito astrócito epêndima axônio Astrocitoma Oligodendroglioma Ependimoma Assim, Os astrócitos dariam origem aos astrocitomas... Os oligodendrócitos, aos oligodendrogliomas... E as células ependimárias, os ependimomas... Havendo ainda neoplasias derivadas de neurônios (e.g., os gangliocitomas e neurocitomas centrais) e neoplasias mistas como os oligoastrocitomas e os gangliogliomas...

10 Classificação da OMS (2000)
Astrocitomas de infiltração difusa Astrocitoma Difuso variantes: fibrilar protoplasmático gemistocítico Astrocitoma anaplásico (maligno) Glioblastoma variantes: glioblastoma de células gigantes gliossarcoma Astrocitoma pilocítico Xantoastrocitoma pleomórfico Astrocitoma sub-ependimário de células gigantes

11 GLIOBLASTOMA Patologia:
Mais agressiva (OMS grau IV); 50-60% dos tumores astrocitários. Acomete adultos; hemisférios cerebrais. Patologia: Astrócitos pouco diferenciados, proliferação vascular e necrose Progressão maligna de um astrocitoma de baixo grau ou astrocitoma anaplásico (glioblastoma secundário) curta história clínica, sem evidência clinico-radiológica de uma lesão precursora menos maligna (glioblastoma primário) (Scherer, 1940; Kleihues e Cavenee, 1997). Gaspareto et al. Arq Neuropsiquiatr Jun;61(2B):468-72

12 GLIOBLASTOMA

13 GLIOBLASTOMA

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15 GLIOBLASTOMA

16 Progressão – Glioblastoma Secundário Kleihues & Cavenee, 2000
Astrócito precursor Astrocitoma OMS II Astrocitoma anaplásico OMS III Glioblastoma OMS IV Astrócito normal Este esquema ilustra como o astrocitomas difuso, seja um gemistocítico, um fibrilar ou um protoplasmático, tende a progredir para se tornar um astrocitoma anaplásico e este a se transformar num glioblastoma multiforme (também chamado de glioblastoma secundário, uma vez que nós também podemos ter a formar de novo). Aqui nós observamos como esta progressão é marcada por alterações morfológicas cumulativas, tais como: hipercelularidade e atipia citológica, no estágio de astrocitoma grau II, maior pleomorfismo e mitoses, no astrocitoma anaplásico, acrescidos de necrose e/ou proliferação vascular no estágio de glioblastoma. Em paralelo, do ponto de vista de patogênese, notamos que esta progressão é decorrente de alterações genéticas, dentre as quais destacamos: a mutação do gene p53 e a perda do braço curto do cromossomo 17 (que levando ao fenótipo de astrocitoma) e perda do cromossomo 10 (que leva ao fenótipo de glioblastoma). Mutação do gene p53 Perda do cromossomo 17p Expressão excessiva de PDGF/PDGFR Perda do cromossomo 22q Desreg. da via do p16 Amplificação do gene CDK4 Perda do 19q Expressão de fatores angiogênicos e moléculas associadas à invasão Perda do cromossomo 10p e 10q (MMAC-1/PTEN) Amplificação do gene do receptor de EGF.

17 Progressão – Glioblastoma Primário Kleihues & Cavenee, 2000
OMS IV Astrócito precursor e Este esquema ilustra como o astrocitomas difuso, seja um gemistocítico, um fibrilar ou um protoplasmático, tende a progredir para se tornar um astrocitoma anaplásico e este a se transformar num glioblastoma multiforme (também chamado de glioblastoma secundário, uma vez que nós também podemos ter a formar de novo). Aqui nós observamos como esta progressão é marcada por alterações morfológicas cumulativas, tais como: hipercelularidade e atipia citológica, no estágio de astrocitoma grau II, maior pleomorfismo e mitoses, no astrocitoma anaplásico, acrescidos de necrose e/ou proliferação vascular no estágio de glioblastoma. Em paralelo, do ponto de vista de patogênese, notamos que esta progressão é decorrente de alterações genéticas, dentre as quais destacamos: a mutação do gene p53 e a perda do braço curto do cromossomo 17 (que levando ao fenótipo de astrocitoma) e perda do cromossomo 10 (que leva ao fenótipo de glioblastoma). Amplif/Super Expr EGFR Amplif/Super Expr MDM2 Deleção p16 Mutação PTEN Alteração RB LOH 10p e 10q

18 GLIOBLASTOMA Fatores preditivos: Fatores preditivos controversos:
secundários menos agressivos O único consenso acerca da sobrevida: ressecção completa da lesão confere uma maior sobrevida. Os índices proliferativos não apresentam correlação com a sobrevida. Prognóstico reservado. Busca por modelos experimentais

19 NG97: Morfologia in vitro Cultura tecido Schenka, A. – Unicamp, 2005
Microscopia de contraste de fase Dupla população (constante): Células redondas Células fusiformes/ “dendríticas” Quando in vitro e em suspensão, ao microscópio de contraste de fase, as células NG97 são arredondadas e monótonas. Ao formarem uma monocamada no fundo do frasco, após deposição, passam a se apresentar como uma dupla população caracterizada por células redondas e fusiformes/dendríticas. Grippo et al, 2001.

20 NG97: Morfologia in vivo Grippo et al, 2001.
In vivo, quando transplantadas em um camundongo nude, crescem formando uma neoplasia pleomórfica, pouco diferenciada, com proliferação vascular e extensas áreas de necrose em pseudo-paliçadas. Estas características poderiam ser compatíveis com um glioblastoma multiforme ou simplesmente com um tumor (e.g., sarcoma) indiferenciado. Grippo et al, 2001.

21 GFAP Tumor original (400X) Células NG97 (400X) % GFAP+
Em primeiro lugar, nós observamos que o GFAP foi positivo difuso e intenso tanto no tumor parental quanto nas células em cultura. No xenotransplante, por outro lado, nós observamos uma diminuição tanto na freqüência quanto na intensidade de expressão. Esta diminuição na freq de células + para GFAP foi estatisticamente significativa. Tumor original Células Xenotranspl. Xenotransplante (400X)

22 Em estudo recente, realizado por Machado, no qual eu tive a oportunidade de participar, as células NG97 foram observadas à microscopia eletrônica de varredura, em diferentes momentos, sendo observado que as células redondas são as primeiras a aparecer na cultura, seguidas pelas células dendríticas e pelas células fusiformes. Foi observado também que o aparecimento das células dendríticas coincide com um aumento na velocidade de crescimento da cultura.

23 Estudo Imunohistoquímico
Tissue microarray : simultâneo e comparativo em todas as amostras dos 44 tumores em dois níveis de corte Bleggi-Torres LF, Gugelmin ES, Cunha IW, Soares FA – Brain Pathology 16(1), S108, 2006

24 Vim x400 Ki67 x400 Ki67 x400 GLut x400

25 *p=0,006 Bleggi-Torres LF, Gugelmin ES, Cunha IW, Soares FA – Brain Pathology 16(1), S108, 2006

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27 Gliomas – Etiologia x Tratamento
Célula tronco neural (Neural Stem Cell – NSC) 3 sub-grupos moleculares: Pró-neural – expressa marcadores de NSC = melhor prognóstico (Notch pathway) Mesenquimal – expressa marcadores de MSC = prognóstico ruim (Akt pathway) Angiomatoso – expressa marcadores proliferativos = prognóstico ruim (Akt pathway) Phillips, H et al. – Cancer Cell 9(3):157-73, 2006 Houillier, C et al. Cancer 106(10): , 2006 Temozolomide (Temodal, Temodar) – agente alquilante + radioterapia (casos novos) Mutter N et al. Expert Rev Anticancer Ther Aug;6(8):