Adalberto Pessoa Junior - Extração Líquido-Líquido de Biomoléculas Extração Líquido-Líquido por Sistemas Micelares Reversos (SMR)

Adalberto Pessoa Junior - Extração Líquido-Líquido de Biomoléculas Extração Líquido-Líquido em Sistemas Micelares Reversos (SMR) Adalberto Pessoa Junior - Extração Líquido-Líquido de Biomoléculas SISTEMAS MICELARES REVERSOS CONCENTRAÇÃO DE ÁGUA x TENSOATIVO Núcleo aquoso Biomolé- culas

Adalberto Pessoa Junior - Extração Líquido-Líquido de Biomoléculas MECANISMO DE ENGLOBAMENTO DE BIOMOLÉCULAS POR MICELA REVERSA Fase Polar (aquosa) Fase Apolar (solvente orgânico) Tensoativo e Biomolécula-alvo Cargas Opostas Tensoativo Contaminante Biomolécula-alvo

Adalberto Pessoa Junior - Extração Líquido-Líquido de Biomoléculas Extração Líquido-Líquido em SMR - Etapa de Reextração Fase Micelar Reversa (micelas reversas + biomoléculas encapsuladas) Nova Fase Micelar Reversa (micelas vazias) Nova Fase Aquosa (↑ força iônica)

Adalberto Pessoa Junior - Extração Líquido-Líquido de Biomoléculas EXTRAÇÃO LÍQUIDO-LÍQUIDO DE XILANASE de Penicillium janthinellum POR MICELAS REVERSAS 2.9 4.6 6.3 8.1 9.8 46.8 41.8 36.8 31.8 26.8 Melhores Condições de Extração pH = 6,3 AOT = 0,57 M T = 46,8 oC AOT  aniônico (-) pH 6,3 > pI 4,2 (+) Raio micelar = 3,7 nm  Maior que  da Enzima (54 kDa)

Adalberto Pessoa Junior - Extração Líquido-Líquido de Biomoléculas EXTRAÇÃO LÍQUIDO-LÍQUIDO DE XILOSE REDUTASE E XILITOL DESIDROGENASE POR MICELAS REVERSAS Adalberto Pessoa Junior - Extração Líquido-Líquido de Biomoléculas Rendimentos XD = 97% XR = 106% Fase II Fase I CTAB Butanol FP= AFE AIn Xilose Xilitol Xilulose XR XD NADPH NADP+ NADP+ NADPH ou NADH NAD+ NAD+ NADH

Adalberto Pessoa Junior - Extração Líquido-Líquido de Biomoléculas EXTRAÇÃO LÍQUIDO-LÍQUIDO DE XILOSE REDUTASE E XILITOL DESIDROGENASE POR MICELAS REVERSAS Adalberto Pessoa Junior - Extração Líquido-Líquido de Biomoléculas Rendimentos XD = 97% - Fase Aquosa XR = 106% - Fase Micelar Reversa CTAB – tensoativo catiônico () Forte atração Fraca atração pHextração = 7,0 pIXR = 4,1  pH > pI XR  negativa XR Fase Aquosa Fase Micelar Reversa XD Excluída pelo tamanho Maior atração eletrostática pIXD = 7,0 pI = pHextração positiva = negativa XD 87 kDa 36 kDa