Microbiologia Aula prática 8 2015/2016 MJC

Sumário P8: Isolamento, cultivo e identificação Streptococcus spp e Identificação das espécie de Streptococcus presentes utilizando: O teste miniaturizado de identificação STREPTO SYSTEM 12R. Preparação da cultura. Caracterização da suscetibilidade a antibióticos da estirpe identificada por antibiograma. Preparação do meio de cultura Agar Nutritivo para o antibiograma. Correção da ficha laboratorial realizada na aula anterior. 16/11/2015 Microbiologia 2015/2016

Caracterização Fisiológica e Bioquímica de Microrganismos A informação sobre a forma e dimensão da célula bacteriana (e das suas colónias) é insuficiente para a sua caracterização/identificação. É comum que estirpes semelhantes quanto à morfologia e tipo de crescimento sejam muito diferentes quanto à sua actividade metabólica. 16/11/2015 Microbiologia 2015/2016

Testes bioquímicos: Actividade de enzimas e hidrólise enzimática de compostos (hidrólise de hipurato, esculina, pirrolidonil beta naftilamida, ONPG) Utilização de fontes de carbono Utilização fermentativa de hidratos de carbono (ribose, arabinose, manitol, sorbitol, trehalose, rafinose) Sistema de transporte de electrões Produção de metabolitos celulares (produção de acetoina) 16/11/2015 Microbiologia 2015/2016

Testes bioquímicos miniaturizados Consistem numa bateria de reações bioquímicas e enzimáticas que produzem alterações de cor STREPTO SYSTEM 12R um sistema de identificação estandardizado para bactérias de Streptococcus. conjunto de 12 microtubos (poços) com substratos desidratados baseia-se na utilização de meios específicos que permitem monitorizar reações bioquímicas e enzimáticas pela alteração da cor. após incubação, os resultados são traduzidos por um código numérico obtido pelo perfil de cor apresentado nos diferentes testes. 16/11/2015 Microbiologia 2015/2016

Testes bioquímicos miniaturizados Os testes bioquímicos miniaturizados são normalmente desenvolvidos para um grupo restrito de espécies ou estirpes. Assim é muitas vezes necessário saber que estamos a usar um organismo pertencente a um determinado género. Como o teste é especifico para Streptococcus vamos verificar de todas as colónias que têm uma por grupo que se suspeite ser Streptococcus. Que informação têm para isso? Tendo escolhido qual a colónia a transferir por técnica de riscado para uma nova placa. 16/11/2015 Microbiologia 2015/2016

Trabalho a realizar (Teste minigalerias): Identificar a colónia de Streptococcus a utilizar (1 por grupo). Transferir a colónia para nova placa. 16/11/2015 Microbiologia 2015/2016 7 7

Antibiograma Uma das formas de caracterização bioquímica de uma estirpe é a identificação da sua susceptibilidade a determinados antibióticos. Este item de caracterização assume um papel fundamental na caracterização de isolados clínicos uma vez que este resultado pode ser utilizado na definição da terapêutica a aplicar. 16/11/2015 Microbiologia 2015/2016

Antibiograma Num antibiograma o antibiótico impregando nos discos de papel difunde-se no agar criando (ou não zonas de inibição do crescimento bacteriano. É a dimensão das zonas de inibição que define a sensibilidade ou resistência do microrganismo. 16/11/2015 Microbiologia 2015/2016

Antibiograma & Concentração mínima inibitória (MIC) A versão anterior é a mais tradicional mas épossível determinar sensibilidade a antibióticos por variantes do antibiograma: e-strip, MICs. 16/11/2015 Microbiologia 2015/2016

Trabalho a realizar (Antibiograma): Preparar o meio de cultura Agar Nutritivo para realizar o antibiograma. 200 ml por grupo Preparar o meio liquido (Agar nutritivo) para transferir a cultura. 50 ml por grupo. Dispensar o meio de cultura em placas de Petri esterilizadas em condições de assepsia. 16/11/2015 Microbiologia 2015/2016 11 11

Recursos http://www.tgw1916.net/video_pages/Antibiogram_video.html 16/11/2015 Microbiologia 2015/2016