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Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Aspectos Epidemiológicos e Sanitários relacionados a Micobactérias Alessandra Marques Cardoso Mestre e Doutoranda.

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1 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Aspectos Epidemiológicos e Sanitários relacionados a Micobactérias Alessandra Marques Cardoso Mestre e Doutoranda em Medicina Tropical - Microbiologia Laboratório de Bacteriologia Molecular Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública Universidade Federal de Goiás Goiânia,

2 Espécies de Mycobacterium : patogenia ao homem PatogênicasPatogênicas em potencial Saprófitas M. tuberculosisM. kansasiiM. gordonae M. bovisM. marinumM. flavenscens M. africanumM. aviumM. gastri M. caprae M. microti M. paratuberculosis M. ammoense M. nonchromogenicum M. thermoresistible M. pinnipeddiM. simiaeM. triviale M. scrofulaceumM. phlei M. azulgaiM. smegmatis M. lepraeM. chelonaeM. vaccae M. abscessus M. massiliense Complexo M. tuberculosis

3 Ácidos micólicos ou Mycomembrana Cápsula glicolipídios peptideoglicana arabinogalactana membrana citoplasmática PAREDE CELULAR DAS MICOBACTÉRIAS

4 PROPRIEDADES FÍSICAS DAS MICOBACTÉRIAS Grande resistência ao ambiente seco. Baixa resistência aos agentes físicos (calor, luz). Resistência variável aos agentes químicos: - fenóis, iodo, álcool e gluteraldeído são relativamente ativos. -mercúrio, bisfenol, amônia quaternária não tem atividade. -clorohexidina e cloro baixa atividade. MNT são naturalmente resistentes à: RIF, PZA, INH, sulfonamidas, tetraciclinas e fluoroquinolonas.

5 Árvore filogenética baseada nas sequências do gene hsp65 de MNT M. abscessus M. senegalense M. mucogenicum M. fortuitum M. peregrunum M. smegmatis M. chelonae A barra indica 1% de divergência estimada

6 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública O complexo M. tuberculosis e o M. leprae são patógenos humanos conhecidos. Outras espécies de micobactérias são usualmente saprófitas, enquanto algumas podem ser oportunistas e até letais. Existem mais de 50 espécies de micobactérias associadas a doenças em humanos. Jordan et. al., 2007

7 Mycobacterium tuberculosis

8 Mycobacterium leprae

9 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Anteriormente as espécies de micobactérias que não causavam tuberculose eram descritas como: micobactérias atípicas ou “mycobacteria other than tubercle bacilli” (MOTT). A nomenclatura corrente, adotada pela American Thoracic Society, descreve esses microrganismos como micobactérias não-tuberculosas (MNT). Jordan et. al., 2007

10 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública MNT estão associadas a determinados ambientes (água, solo) e têm emergido como uma das principais causas de infecções respiratórias oportunistas. Entre as diferentes MNT, o complexo M. chelonae- abscessus destaca-se como importante grupo que consiste em três membros proximamente relacionados: M. chelonae M. abscessus M. immunogenum Wilson et. al., 2001

11 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública

12 Mycobacterium abscessus Causa infecções cutâneas localizadas e ∕ ou generalizadas. MNT mais freqüente nas infecções de tecidos moles e nas infecções em pacientes respiratórios crônicos (FC). Infecções associadas a trauma com materiais contaminados, injeções, procedimentos cirúrgicos não estéreis e implantação de corpos estranhos.

13 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Mycobacterium massiliense Descrito como uma nova espécie por Adékambi et al., 2004 (Marseille → Massilia → massiliense ). Patógeno oportunista, envolvido em infecção de ferida, formação de abscesso e pneumonia.

14 Árvore filogenética da combinação da seqüência dos genes rpo B e rec A de M. massiliense e outras espécies. Barra indica 2% de divergência na seqüência de nucleotídeos. Adékambi et al., 2004.

15 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Mycobacterium bolletii Recentemente caracterizado e reconhecido como espécie distinta por Adékambi et al., 2006.

16 Árvore filogenética do gene rpo B de M. bolletii e outras espécies. Barra indica 2% de divergência na seqüência de nucleotídeos. Adékambi et al., 2006.

17 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Surtos de infecção hospitalar por M. abscessus e M. chelonae têm sido descritos desde Por que as MNT podem causar infecções hospitalares? 1.Presença destes microrganismos na água do hospital; 2.Relativa resistência ao glutaraldeído ou cloro; 3.Habilidade para sobreviver e crescer em água destilada e em amebas; 4.Envolvimento na formação de biofilmes; Adékambi et. al., 2006; Zhang et. al., 1997

18 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Existem vários relatos de infecção por MNT após... Traumas Cirurgias diversas Cirurgia cardíaca Cirurgia plástica facial Cirurgia dermatológica Mamoplastia Acupuntura Lipoaspiração Injeção de silicone Implante de mama Pedicure Injeção subcutânea Injeção de antibióticos Injeção de corticóides Injeção de medicamentos alternativos Implantação de próteses etc... Brown-Elliott et al., 2002; Uslan et al., 2006

19 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Têm sido reportados surtos e pseudo-surtos relacionados a: Úlceras de pele e tecido subcutâneo; Infecções pulmonares; Bacteremia relacionada a diálise e cateteres; Procedimentos de broncoscopia, laparoscopia e artroscopia; LASIK (keratitis after laser in situ keratomileusis). Freitas et al., 2003

20 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Relatos de surtos de infecções causadas por MNT estão aumentando em todo o mundo. Informações sobre a relação genética dos isolados obtidos durante o surto podem prover oportunidades para rápida intervenção.

21 Emergence of nosocomial Mycobacterium massiliense infection in Goiás, Brazil. Cardoso et al., 2008, Microbes and Infection.

22 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Diagnóstico Laboratorial Coleta: biópsia ou amostra de tecido, secreção de abscessos (tubo estéril sem conservante ou fixador). Amostras não aceitáveis: em swab; em formol. Coloração de Ziehl-Neelsen: sensibilidade céls./mL. Cultura em Lowenstein-Jensen: 37°C e 25°- 30°C.

23 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública MCR < 7 dias MCL > 7 dias Diagnóstico Laboratorial – identificação por testes fenotípicos: tempo e temperatura de crescimento, produção de pigmento

24 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Jordan et al., 2007 ( The society for Applied Microbiology, Letters in Applied Microbiology )

25 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Diagnóstico Laboratorial Testes fenotípicos - Identificação bioquímica Acúmulo de niacina: M. tuberculosis (+). Redução do nitrato: M. tuberculosis (+). Ácido p-nitrobenzóico (PNB-500  g/mL): inibe crescimento das espécies do complexo M. tuberculosis. TCH (hidrazina do ácido tiofeno): distingue M. tuberculosis (resistente) das outras espécies do complexo M. tuberculosis (sensíveis).

26 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Diagnóstico Laboratorial Identificação molecular por PRA- hsp65 Produto da PCR hsp 65 submetido à digestão enzimática Telenti et. al J. Clin. Microbiol.

27 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Devallois et. al, e e 60 M. massiliense ou M. bolletii M. abscessus

28 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Tratamento Sensíveis à amicacina e claritromicina. Teste de suscetibilidade in vitro pelo método de microdiluição em caldo. NCCLS, 2003 (M24-A) – Antimycobacterial Susceptibility Testing for Rapidly Growing Mycobacteria: amicacina, cefoxitina, ciprofloxacina, claritromicina, doxiciclina, sulfametoxazol, tobramicina, linezolida. *ANVISA/OPAS/OMS, Edital n  13 - Monitoramento e Prevenção da Resistência Bacteriana em Serviços de Saúde.

29 Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Genotipagem por PFGE Emergence of nosocomial Mycobacterium massiliense infection in Goiás, Brazil. Cardoso et al., 2008, Microbes and Infection.

30 Agradecimentos Laboratório de Bacteriologia molecular - IPTSP – UFG Dr. André Kipnis Laboratório de Imunopatologia – IPTSP - UFG Dra. Ana Paula Junqueira-Kipnis Eduardo Martins Laboratório de Micobactérias – EPM - UNIFESP Dra. Sylvia Cardoso Leão Dra. Cristina Viana-Niero LACEN - GO Sueli Lemes Alves COMCIES – SMS – Goiânia - GO Zilah Cândida Pereira das Neves Apoio financeiro: CNPq, OPAS-ANVISA

31 Obrigada! “O mais importante da vida não é a situação em que estamos, mas a direção para a qual nos movemos.” Oliver W. Holmes,


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