Luz normal 50 kDa Bate com banda no SDS PAGE? Membrana grupo 2/3 (marcada) Canaletas 1 & 2 visíveis (seria pellet e raw extract?) quimioluminescência
P S F E PM P S F E Grupos 4,5 Grupos 2,3 P, fração pellet, S, sobrenadante clarificado, F, sobrenadante após coluna , E, eluição fração 2 de 5
Resultado PCR amplificação arginase PM 1 2 3 4 5 2300 2100 ? Duas bandas? 570 Primer-dimer 107
Teste realtime PCR-oligos arginase (amplicon de 80 nt) PM: pcDNA3 Rsa1/Bgl2-EcoR1 digest PM 1 2 neg 1: ~0,2 ug gDNA 3D7 2: 0,1 ug cDNA 14 h trofozoitas Neg: controle sem template 926 487 255 170/157 107 55
Resultados arginase transcripts o-o
Resultados crús
Melting curve – curva de dissociação
12 Minipreps pASK/IBA3 arginase H218A, digestão com Nae3 PM * 1 2 3 4 5 6 7 8 4500 2418 1688 926 487 9 10 11 12 PM Gel de TAE agarose 1% PM: digestão pcDNA3 Rsa1/EcoR1-Bgl2 *É um dos plasmídeos sem enzima de restrição Nae3 Note que o tampão HB1 acidentalmente não continha RNAse A.
Não tenho foto de um gel dos clones pASK/IBA3 com arginase wildtype clonado