EXPERIÊNCIA DO INSTITUTO ADOLFO LUTZ NA INVESTIGAÇÃO DE SURTOS III SIMPÓSIO ESTADUAL DE INFECÇÃO HOSPITALAR EXPERIÊNCIA DO INSTITUTO ADOLFO LUTZ NA INVESTIGAÇÃO DE SURTOS TÂNIA MARA IBELLI VAZ Instituto Adolfo Lutz

BACTÉRIAS DE IMPORTÂNCIA EM • GRAM NEGATIVOS – Cocos / bacilos INFECÇÃO HOSPITALAR • GRAM POSITIVOS – Cocos / bacilos • GRAM NEGATIVOS – Cocos / bacilos

BACILOS GRAM NEGATIVOS (BGN) Importância em infecção hospitalar ENTEROBACTÉRIAS - BGN NÃO FERMENTADOR

Família Enterobacteriaceae Classificação:  Gêneros (42)  Espécies (centenas) • Enteropatógenos clássicos (diarréias) • Infecção hospitalar - espécies importantes • Outras espécies - raras em material clínico • Espécies que não são isoladas em material clínico Patógenos oportunistas

FAMÍLIA Enterobacteriaceae Enteropatógenos clássicos (diarréias) • Salmonella • Shigella • E.coli diarreiogênica (EPEC,ETEC,EHEC,EAEC, DAEC) • Y. enterocolitica

FAMÍLIA Enterobacteriaceae Infecção hospitalar Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Klebsiella oxytoca Proteus mirabilis Enterobacter spp Salmonella (sorotipos) Serratia marcescens Citrobacter spp Providencia spp

Identificação presuntiva Meio IAL (Pessoa e Silva) Identificação presuntiva

BGN NÃO FERMENTADOR PRINCIPAIS GÊNEROS Pseudomonas, Burkholderia, Stenotrophomonas,Ralstonia, Brevundimonas, Comamonas e Acidovorax Acinetobacter , Moraxella, Shewanella, Chryseobacterium Achromobacter, Alcaligenes,Agrobacterium, Ochrobactrum Outros BGN NF

Principais espécies de BGN Não Fermentador Pseudomonas aeruginosa infecções graves e fatais Acinetobacter baumannii Burkholderia cepacia Stenotrophomonas maltophilia Chryseobacterium meningosepticum infecções graves e fatais Achromobacter xylosoxidans Achromobacter piechaudii Ochrobactrum anthropi

IDENTIFICAÇÃO DA ESPÉCIE Conjunto de características morfológicas e metabólicas

• SISTEMAS COMERCIAIS E AUTOMATIZADOS Utilizados por muitos laboratórios clínicos Permitem a identificação dos microrganismos em nível de espécie. - Resultados rápidos

• SISTEMAS CONVENCIONAIS Testes bioquímicos - Laboratórios de Referência - Espécies não identificadas - Espécies atípicas e raras

IDENTIFICAÇÃO DA ESPÉCIE Pode ser a primeira pista da ocorrência de um surto Clínica Falsos surtos Não identificação do surto (BGN NF) Permite a detecção de espécies raras e atípicas como causa de surtos

MÉTODOS DE TIPAGEM - MÉTODOS FENOTÍPICOS - MÉTODOS GENOTÍPICOS Identificação de uma cepa particular em uma espécie - MÉTODOS FENOTÍPICOS - MÉTODOS GENOTÍPICOS • Escolha do método – depende da espécie

MÉTODOS FENOTÍPICOS ANTIBIOGRAMA SOROTIPAGEM FAGOTIPAGEM

MÉTODOS MOLECULARES: RIBOTIPAGEM PULSED FIELD GEL ELECTROPHORESIS (PFGE) PERFIL PLASMIDIAL RAPD (Randomly amplified polymorphic DNA) PFGE PCR

Enterobacter cloacae e Enterobacter agglomerans Surto de bacteriemia – solução de nutrição parenteral 73 amostras – 3 laboratórios IAL (VE) E.cloacae / 7 – sangue 16 E.agglomerans / 2 sangue E.Cloacae (sangue e soluções) Biotipo 26 Sorotipos O3 Ribotipo E1B1 Perfil de S: CX CF AP GN Outros tipos foram encontrados em algumas bolsas ONT, O19, O14 E.Agglomerans Ribotipo E6B6 S - a todas as drogas

Enterobacter cloacae e Enterobacter agglomerans Surto de bacteriemia – solução de nutrição parenteral Perfil plasmídial Ribotipagem EcoRI e BamHI Ribotipos BamHI 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Kb 6.3 3.2 Ec O3 E.Cloacae E.agglomerans

Surto Infecção Hospitalar Kluyvera sp 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Kb 6.3 3.2 1.5 4,5,6,7, Kluyvera sp

Surto de bacteriemia por Pseudomonas aeruginosa em uma unidade de hemodiálise Hemocultura de 11 pacientes .........P.aeruginosa (4) Água – P.aeruginosa e/ ou B. cepacia Sorotipos Piocinotipos Ribotipos Amostras dos pacientes e uma da água de hemodiálise: O15 P10 AP CF CL CO CX TT E1B1 Outras amostras de água : O4 O7,8 O10 O11

Surto de Klebsiella pneumoniae ESBL + berçário PFGE 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 KB 1,15 Padrão de massa molecular, 5- 11,13,14 -(KI)