Lab. Biologia Molecular Aplicado ao Diagnóstico Dept Lab. Biologia Molecular Aplicado ao Diagnóstico Dept. Análises Clínicas e Toxicologia Faculdade de Ciências Farmacêutica Universidade de São Paulo Aluno: Aécio Assunção Braga Angiotensin-converting enzyme insertion/deletion and angiotensin type 1 receptor A1166C polymorphisms as genetic risk factors in benign prostatic hyperplasia and prostate cancer Erick Sierra Díaz,* José Sánchez Corona,† Roberto Carlos Rosales Gómez,†# Susan Andrea Gutierrez Rubio,†# José Gonzalo Vázquez Camacho,* Héctor Solano Moreno,* María Cristina Morán Moguel† São Paulo 2010

INTRODUÇÃO O que é próstata? A próstata é uma glândula que só o homem possui e que se localiza na parte baixa do abdômen. Ela é um órgão muito pequeno, tem a forma de maçã e se situa logo abaixo da bexiga e à frente do reto. A próstata envolve a porção inicial da uretra, tubo pelo qual a urina armazenada na bexiga é eliminada. É também na próstata onde se produz parte do sêmen, líquido espesso que contém os espermatozóides, liberado durante o ato sexual. Fonte: http://www.inca.gov.br/conteudo_view.asp?ID=129

INTRODUÇÃO Fonte: http://blig.ig.com.br/riorestaurador/files/2009/09/prostata.gif

INTRODUÇÃO Hiperplasia Prostática Benigna (HPB) Ocorre em mais de 50% dos homens com mais de 50 anos de idade; em mais de 80% dos homens com mais de 70 anos de idade Hiperplasia do tecido normal Apresenta freqüentemente focos de tecido claramente neoplásticos (detectados apenas na autópsia) Acompanhada de pequenos aumentos dos níveis de PSA (mais de 95% dos casos apresentam níveis inferiores a 10) Fonte: http://reivax.tripod.com/cancerpg14.htm

INTRODUÇÃO Fonte: http://www.jornal.uem.br/galeria/albums/jornal_61/normal_j61-000-prostata.jpg

INTRODUÇÃO Câncer de Próstata É a neoplasia maligna viceral mais comum na população masculina do México Apresentando em 2003, taxa de morbidade 5,94% e taxa de mortalidade 9,90% Nos EUA, representa 1/3 das neoplasias malignas viceral Aparecendo em 17,6% dos homens brancos e 20,6% em Afro-Americanos Com risco de morte 2,8% e 4,7%, respectivamente nessas populações História familiar

INTRODUÇÃO Loci de sucetibilidade ao CP HPC1/RNASEL HPC2/ELAC2 MSR1 BRCA2 PCAP, HPCX, CAPB, HPC20, CHEK2, PTEN, TP53, AR, CDKN2A e ATBF1

INTRODUÇÃO Variação genética Variações germinativas (POLIMORFISMOS) Mutações genéticas somáticas

INTRODUÇÃO Sistema Renina-Angiotensina (RAS) Relação do RAS com o câncer Angiotensina II (peptídeo biologicamente ativo) - AGTR1 - AGTR2

INTRODUÇÃO A relação do AGT1R com CP (expressão do RNA) O papel da Angiotensina II nos receptores no tratamento do CP A relação da ACE e o CP (fatores genéticos)

MATERIAIS E MÉTODOS Amostras e genotipagem Revisaram 20 amostras patológicas com câncer de próstata e 20 casos com HBP Período de julho de 2006 à junho de 2007 (Dept. de Patologia da National Western Medical Centre) Classificaram as amostras através do escore de Gleason Extração de DNA (Lab. De Medicina Molecular do Centro de Ivestigação Biomédica)

MATERIAIS E MÉTODOS

MATERIAIS E MÉTODOS Amostras e genotipagem PCR RFLP (Hae III) Gel de poliacrilamida 8% População Geral (GP) Comitê Local de Ética e Pesquisa em Saúde

MATERIAIS E MÉTODOS

MATERIAIS E MÉTODOS Análise estatística Os testes utilizados para análise estatística foram: - Qui-quadrado (X2) - Teste t student Para comparar os grupos utilizou-se: - Teste exato de Fisher - Odds ratio (OD) - Intervalo de confiança de 95% (IC 95%)

RESULTADOS

RESULTADOS Associação de teste para o polimorfismo ACE (HBP x GP) Genótipo e o alelo - HBP x GP (p = 0,00016) Génotipo-fenótipo com IC de 95% - D em I x alelo D (p = 0,0001) - II x DD (p = 0,00120) - II x ID + DD (p = 0,02244) - I em D x alelo I (p = 0,00001) - DD x ID (p = 0,00077) - DD x II (p= 0,00120) - II + DD x DD (p = 0,00004)

RESULTADOS PC x GP para o polimorfismo ACE Para o alelo D - alelo I x alelo D (p= 0,00062) - II x ID (p= 0,03550) - II x DD (p= 0,00161) - II x ID + DD (p= 0,00599) Para o alelo I - alelo D x alelo I (p= 0,00062) - DD x II (p= 0,00161) - II + ID x DD (p= 0,00890)

RESULTADOS Associação de teste para o polimorfismo AGT1R HBP x GP - CC x AC (p= 0,03889) - CC x AA (p= 0,00011) PC x GP - Para o alelo A em CC x AC (p= 0,00283) - CC x AA (p= 0,1211)

RESULTADOS

RESULTADOS

DISCUSSÃO O gene ACE está localizado no cromossomo 17q23 Descrito pela 1ª vez por Rigat et al. Consistindo na inserção ou deleção do fragmento Alu de 287pb AGT1R localizado no cromossomo 3q23 É o principal mediador da angiotensina II Ainda não foram bem descritos a expressão celular e molecular do ADT1R

DISCUSSÃO Comparação intergrupos do ECA (I / D) Alelo D com maior frequência nos grupos PC e HBP O genótipo DD com menor frequência no grupo GP Diferença significativa entre HBP e GP, em relação a homozigose do alelo D (OR= 21,87 IC 95% = 2,314-206,479) Houve diferença significativa entre PC e GP, em relação a homozigose do alelo D (OR= 31,66 IC 95% = 1,601-626,212) e heterozigose (OR= 11,40 IC 95% = 0,576-225,436)

DISCUSSÃO Comparação intergrupos do A1166C AGT1R Diferença significativa entre o grupo HBP e PC para o alelo C em heterozigose (OR= 7,429 IC 95% = 1,778-31,040) Houve diferença entre o grupo GP e HBP para o alelo A heterozigoto OR= 56,07 (IC 95% = 0,546-1097,122) e OR= 10,385 (IC 95% = 1,260-414,300) Diferenças encontradas para heterozigoto e homozigoto do alelo A entre o grupo PC e GP com OR= 22,846 (IC 95% = 1,260-414,300) e OR = 18,692 (IC 95% = 0,870-401,830), respectivamente.

CONCLUSÃO Polimorfismo (I / D) da ECA O polimorfismo (I / D) da ECA está associado com HPB, na presença do alelo D O alelo D está associado com risco maior de CP O alelo I no estado heterozigoto pode atuar como fator protetor de CP

CONCLUSÃO Polimorfismo A1166C AGT1R A presença do alelo A, principalmente no estado homozigoto, está associado com risco de HBP O risco de desenvolver CP está associado com a presença do alelo A, porém com menor o risco quando comparado com aparecimento de HPB O genótipo AC está associado com escore de Gleason moderado A presença do alelo C está associado com risco de ter CP

OBRIGADO!!!