Desmitificando do ABNT ISO Guia 34 Rosane Maria Temporal Gestora da Qualidade LPL/LRNTL/CLIOC – FIOCRUZ/IOC http://clioc.fiocruz.br clioc@fiocruz.br temporal@ioc.fiocruz.br Desmitificando do ABNT ISO Guia 34 Estudo de Caso Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Parte 2

BRC candidates compliance with ISO 17025 in 2008 (“ex-situ” evaluation): Met req. (%) Not met req. (%) in implementation process req. (%) Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Controle de Acesso e de Temperatura e Umidade do Ambiente Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Troca de Equipamentos e registro de Controle de Temperatura Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Controle e Validação de Equipamentos Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Controle e Validação de Equipamentos

Controle pipetas por ensaio (codificação por cores, calibrações) Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Controle de resíduos biológicos Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Cilindros de N2 e CO2 em área externa Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Controle de Chuveiros e Lava Olhos e conhecimento da localização de extintores de incêndio (treinamento) Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Equipamentos de Proteção Individual Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Sistema de exaustão e controle do nível de oxigênio da sala Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Sistema de Reposição de LN2 por pressão Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Sistema de Suspensão de Canister de Amostras Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Sala de Recebimento/Entrega de amostras Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Entrada da Sala de Cultura e Criogenia Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Sala de Manipulação e Cultura de Amostras Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Sala de Criogenia e Acervo da Coleção Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Área de Ensaio de Amostras Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz como modelo de CRB para a Fiocruz: Pesquisa e Qualidade 2009: 2010: Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

2011: Participação: DVD-ROM - MANUAL PARA GESTÃO DE DOCUMENTOS E ARQUIVOS DE LABORATÓRIOS DAS CIÊNCIAS BIOMÉDICAS Organizador: Paulo Roberto Elian dos Santos Casa de Oswaldo Cruz / FIOCRUZ  Ano de lançamento: 2011 Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Coleção de culturas CRB PMR Introdução a NIT DICLA 061:2012 Auditoria Interna 08/2014 Início da Consultoria 04/2014 Coleção de culturas CRB PMR 2014 Introdução ao ISO GUIA 34 2013 Introdução a NIT DICLA 061:2012 Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Laboratório de ensaio e calibração ISO 17025 Requisitos gerais para competência de laboratórios de ensaio e calibração ABNT NRB ISO IEC 17025:2005 International Organization for Standardization Centro de Recursos Biológicos OECD 2007 Best Practice Guidelines for Biological Resource Centres – Paris France, 2007 Organization for Economic Co-Operation and Development Requisitos sobre a acreditação dos laboratórios de ensaio e dos produtores de materiais de referência dos centros de recursos biológicos ISO GUIA 34 (NIT DICLA 061:2012) Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Adequação para a Acreditação de Produtores de Materiais de Referência Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Produtor de material de referência “Organismo (organização ou empresa, pública ou privada) que é completamente responsável pelo planejamento do projeto e gestão, atribuição e decisão dos valores de propriedade e incertezas relevantes, autorização de valores de propriedade e emissão de certificado ou outras declarações para materiais de referência que produz.” Candidato a PMR: CLIOC

MR: Amostras Tipo de Leishmania sp. Material de Referência “Material suficientemente homogêneo e estável com respeito a uma ou mais propriedades especificadas, que foi estabelecido como sendo adequado para o seu uso pretendido em um processo de medição.” Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania MR: Amostras Tipo de Leishmania sp. Propriedades do MR: identidade das espécies Uso: (i) desenvolvimento de pesquisa em ciência, tecnologia, inovação, vigilância epidemiológica, sistemática, taxonomia; (ii), desenvolvimento de imunobiológicos e de novos medicamentos.

Política da Qualidade Sistema de gestão Inserção da Política da Qualidade para todos os aspectos da produção de MR. Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania ISO GUIA 34 - Inserção de procedimentos de: avaliação do grau de homogeneidade do material de referência; avaliação da estabilidade do material de referência; atribuição de valores de propriedade, incluindo preparação de certificados ou declarações. Sistema de gestão

Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Auditorias internas ISO GUIA 34 - Inserção no Sistema de Gestão da Qualidade que o programa de auditoria interna deve cobrir todos os elementos do sistema de gestão, incluindo as atividades técnicas e de produção que levam ao produto acabado (material de referência)

Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Pessoal Capacitação e/ou treinamento para executar atividades relacionadas à produção de candidatos a materiais de referência, sendo: - na NIT-DICLA-061; - no DOC-CGCRE-034; - na série 30 de ISO Guias.

Requisitos técnicos e de produção Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Requisitos técnicos e de produção ISO GUIA 34 - Estabelecer os processos de avaliação de homogeneidade e estabilidade Avaliação da homogeneidade: Procedimento para estabelecer que o grau de homogeneidade do material de referência, em relação à(s) propriedade(s) de interesse, seja adequado ao propósito. Avaliação da estabilidade: Procedimento que visa confirmar a estabilidade do material (no armazenamento e no transporte).

Avaliação da homogeneidade Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Avaliação da homogeneidade Propriedade de interesse: Identidade das cepas de Leishmania. Avaliação da homogeneidade : realizado pelo ensaio de MLEE em ampolas aleatórias de um mesmo lote e lotes distintos de uma mesma amostra. Avaliação da estabilidade No armazenamento: verificação da viabilidade das cepas de Leishmania estocadas em LN2 em função do tempo de prateleira. Avaliação de ampolas aleatórias de lotes de diferentes tempos de armazenamento. Após o descongelamento, realizar contagem para determinar a viabilidade celular, em Câmara de Newbauer, em comparação com amostras de referência mantidas em condições ideais pré definidos.

Avaliação da estabilidade Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Avaliação da estabilidade No transporte: verificação da estabilidade do MR em função da viabilidade celular das cepas de Leishmania mantidas em diferentes temperaturas (25ºC±3), armazenadas em caixa de transporte específica para material biológico, por um determinado período de tempo (01-10 dias). Avaliação de ampolas aleatórias de lotes de diferentes tempos de armazenamento da mesma amostra, comparadas com amostras de referência mantidas em condições ideais pré definidas. Início da validade: data do envio do material

Procedimentos de verificação necessários para garantir a qualidade de cada estágio da produção de material de referência: - controle dos lotes de: meios de cultura fase líquida e sólida, material plástico, preparo e esterilização de vidrarias, água regente, soluções/reagentes; - controle dos lotes de controles de ensaio; - documentação e procedimento para o recebimento e armazenamento de material a ser utilizado como insumo para a produção do material de referência a ser distribuído; - nível adequado de contenção; - avaliação e análise de risco determinada. Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Controle de Produção

Acomodações e condições ambientais Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Acomodações e condições ambientais Todas as áreas de processamento de material de referência e ensaio apresentam controle de: umidade e temperatura, contaminação microbiológica, Nível de Biossegurança (NB). todos os processos são documentados e monitorado com equipamentos calibrados apropriados, controlados e registrados; precauções apropriadas de saúde, segurança e proteção ambiental são estabelecidas.

Manuseio e armazenamento de materiais Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Manuseio e armazenamento de materiais Devido a questões sobre Bioproteção, o ideal para material biológico é que os rótulos estejam codificados (código de barras); Informações como: o material, o produtor, lote e número de catálogo, meio de manutenção, nível de risco, etc, devem ser inclusas no certificado.

Processamento de material Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Processamento de material São definidos registros e aceitação de fornecedores de insumos; As amostras são periodicamente analisadas por ensaios de viabilidade e pureza; O processamento das amostras de referência é realizado através de ensaios validados periodicamente; Todas as amostras de referência são validadas periodicamente.

Caracterização Método para atribuição do valor de propriedade. Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania Caracterização Método para atribuição do valor de propriedade. Ensaio de Multilocus enzyme electrophoresis (MLEE). Identifica precisamente amostras de Leishmania em estudo, definindo o grau de identidade entre uma determinada amostra e uma espécie de Leishmania já descrita, caracterizando-a quanto à espécie e classificando em zimodemas a partir das variações observadas em um conjunto de sistemas enzimáticos. Padrão ouro na identificação de Leishmania. Ensaio de PCR e seqüenciamento do alvo Hsp70. Identificação molecular de isolados de Leishmania.

Serviço de distribuição São definidos para o serviço de distribuição: condições de transporte; documentação específica para material biológico; embalagem adequada, seguindo a regulamentação nacional e internacional; treinamento e licença para o responsável pelo preparo do envio; registro atualizado de toda a distribuição de MR; orientação e apoio técnico adequado sobre o MR produzido e distribuído. Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Indicadores de Produtividade Desde sua criação a CLIOC recebeu mais de 3000 amostras para depósito e/ou caracterização. Atualmente, o acervo é composto de pouco mais de 1.100 cepas. Indicadores de produtividade dos últimos 4 anos: ½ Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania

Obrigada!!! Ministério da Saúde Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Pesquisa em Leishmaniose Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz Laboratório de Referência Nacional para Tipagem de Leishmania