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Teve início com a utilização de colunas preenchidas com géis químicos. Aparecimento de bolhas (perda de condutividade), Aparecimento de bolhas (perda.

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2 Teve início com a utilização de colunas preenchidas com géis químicos. Aparecimento de bolhas (perda de condutividade), Aparecimento de bolhas (perda de condutividade), Retenção de fragmentos com alto peso molecular, Retenção de fragmentos com alto peso molecular, Degradação do gel por hidrólise. Degradação do gel por hidrólise. Esse método foi descartado dado o grande número de problemas que surgiram,como: Matrizes poliméricas hidrofílicas, dissolvidas em tampão apropriado Matrizes poliméricas hidrofílicas, dissolvidas em tampão apropriado Eliminar o fluxo eletroosmótico através de uma ligação covalente com os grupos da superfície capilar Eliminar o fluxo eletroosmótico através de uma ligação covalente com os grupos da superfície capilar Evitar a extrusão do gel durante operação do sistema, através da ligação covalente com o gel Evitar a extrusão do gel durante operação do sistema, através da ligação covalente com o gel Tais problemas levaram à formulação de novos sistemas, denominados géis físicos Temperatura Temperatura pH pH Força iônica Força iônica Concentração do meio. Concentração do meio. Os géis são estruturas delicadas, sujeitas a mudanças de morfologia pela ação da Prof. Genetica Forense Uma das principais vantagens de realizar separações por ECG é: O formato do capilar, preenchido com gel possibilita a dissipação eficiente do calor gerado pelo efeito Joule, O formato do capilar, preenchido com gel possibilita a dissipação eficiente do calor gerado pelo efeito Joule, em razão da : em razão da : geometria do capilar e das geometria do capilar e das propriedades anti- convectivas do gel. propriedades anti- convectivas do gel.

3 A) brometo de etídio;A) brometo de etídio; B) nitrato de prata;B) nitrato de prata; C) raio – X;C) raio – X; D) quimiluminescência;D) quimiluminescência; E) coomasie blueE) coomasie blue F) fast blue BB salt, a e ß naftil acetato.F) fast blue BB salt, a e ß naftil acetato. Diferentes sistemas de revelação dos géis: Prof. Genetica Forense

4 1- Identificação de pessoas: em testes de paternidade 2- Identificação de criminosos 3- Industria Farmacêutica (Vacinas, Reagentes de diagnóstico) 4- Agropecuária (Animais e plantas transgênicos) Aplicações na: Prof. Genetica Forense

5 Coleta do sangue Extração do DNA Amplificação PCR Digestão Eletroforese Southern Blotting visualização

6 Figura Inclusão - Observe que um dos alelos (banda) do filho é proveniente da mãe e o outro alelo proveniente do suposto pai. Neste caso, a paternidade fica comprovada. Figura Exclusão - Observe que um dos alelos (banda) do filho é proveniente da mãe. O outro alelo, no entanto, difere dos alelos do suposto pai. Neste caso, ocorreu uma exclusão de paternidade. Prof. Genetica Forense


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