Luz normal 50 kDa Bate com banda no SDS PAGE? Membrana grupo 2/3

Apresentação em tema: "Luz normal 50 kDa Bate com banda no SDS PAGE? Membrana grupo 2/3"— Transcrição da apresentação:

1 Luz normal 50 kDa Bate com banda no SDS PAGE? Membrana grupo 2/3 (marcada) Canaletas 1 & 2 visíveis (seria pellet e raw extract?) quimioluminescência

2 P S F E PM P S F E Grupos 4,5 Grupos 2,3
P, fração pellet, S, sobrenadante clarificado, F, sobrenadante após coluna , E, eluição fração 2 de 5

3 Resultado PCR amplificação arginase
PM 2300 2100 ? Duas bandas? 570 Primer-dimer 107

4 Teste realtime PCR-oligos arginase (amplicon de 80 nt)
PM: pcDNA3 Rsa1/Bgl2-EcoR1 digest PM neg 1: ~0,2 ug gDNA 3D7 2: 0,1 ug cDNA 14 h trofozoitas Neg: controle sem template 926 487 255 170/157 107 55

5 Resultados arginase transcripts o-o

6 Resultados crús

7 Melting curve – curva de dissociação

8

9 12 Minipreps pASK/IBA3 arginase H218A, digestão com Nae3
PM * 4500 2418 1688 926 487 PM Gel de TAE agarose 1% PM: digestão pcDNA3 Rsa1/EcoR1-Bgl2 *É um dos plasmídeos sem enzima de restrição Nae3 Note que o tampão HB1 acidentalmente não continha RNAse A.

10 Não tenho foto de um gel dos clones pASK/IBA3 com arginase wildtype clonado